來看看預染蛋白marker分子量標準

 　　蛋白marker可分為未預染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準以及預染蛋白marker即單色預染和多色預染。那么，什么是預染蛋白marker?預染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍色染料共價偶聯(lián).可在凝膠電泳時出現(xiàn)強度均勻的8條帶.同未預染的蛋白marker相比,預染蛋白marker因與染料共價偶聯(lián)而在SDS-PAGE電泳時的遷移特性發(fā)生某些改變.

　　預染蛋白marker分子量標準

　　預染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物，通過與染料共價耦聯(lián)，在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染蛋白分子量的出現(xiàn)方便了我們的實驗，這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時、電泳后，以及轉膜后監(jiān)測電泳情況和估計遷移率——比如，已知垂直電泳分辨區(qū)域大約在膠的2/3處，如果使用預染Marker就可以預測目標蛋白進入分辨區(qū)時停止電泳以得到分辨效果;如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳;另外在Western Blot轉膜以后可以直接觀察蛋白轉膜是否*，還可以在膜上標記蛋白分子量，所以吸引了許多實驗室人員購買預染蛋白標準。值得注意的是預染蛋白Marker與染料共價耦聯(lián)，所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發(fā)生某些變化，可能導致一些偏差，所以不太適合定位蛋白——不過多數(shù)情況下Marker的條帶未必能和我們的目標蛋白*一樣，我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小，后都需要Western來定性，所以如果不是要區(qū)分大小相近的條帶，預染Marker還是很好用的，而且也可以和未染色的蛋白標準一起使用。

　　預染蛋白標準可以分為兩種：單色預染和多色預染，其實區(qū)別就在于幫助在實驗過程中辨認某個條帶的大小——Marker條帶越多參考價值越大，可就越難辨認區(qū)分，如果用不同的顏色來區(qū)別就比較好辨認啦。如果沉悶的電泳實驗中跑出五顏六色的彩虹Marker，此時心情想必會愉快一些!單色的Marker通常是利用其中某些條帶加倍濃度來提示其大小的。還有一點特別要注意，由于轉膜是一個將膠里的Marker濃縮在潔白的膜上，所以需要的上樣量相對少一些，如果想要在電泳過程中看到美麗的“彩虹”，或者單色的Marker往往需要比說明書里多加一些Marker的。